鄰苯二甲醛法測(cè)定尿素的體會(huì)
發(fā)布時(shí)間：
2022-10-18
尿素是最早被測(cè)定的體液中的物質(zhì)之一t其測(cè)定方 法主要有二乙酰乙肟法、脲酶法、酶偶聯(lián)速率法等t這些方法或是存在煮沸，或是試劑價(jià)格較昂貴 目前，市場(chǎng)上
供應(yīng)了鄰苯二甲醛顯色法(OPA)測(cè)定尿素試劑盒，該 法不需煮沸，簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定易得。我們根據(jù)反應(yīng) 原理，在 ISP-M 半自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行尿素測(cè)定， 效果滿意。特做報(bào)道
1 原理
在酸性環(huán)境中，血清中的尿素在_妾替比林存在下與 鄰苯二甲醛作用生成黃色物質(zhì)，該物質(zhì)在偏釩酸根的作 用下變?yōu)樗{(lán)色物質(zhì)。該物質(zhì)藩液顏色的深淺在一定范圍
內(nèi)與血清尿素濃度成正比，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)物一起比 色測(cè)定，即可得到血清標(biāo)本中尿素的濃度。
2 材料與方法
2．I 試劑 OPA法測(cè)定尿索試劑盒}其中包括A液 B 液，尿素標(biāo)準(zhǔn)液，僳定長(zhǎng)城臨床試劑公司t批號(hào) 951102。 酶偶聯(lián)速率法測(cè)定尿素試劑盒：上海長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限
公司，批號(hào) 950828
2．2 儀器
IsP—M 半自動(dòng)生化分析僅，型號(hào)V／talob 一 21。
2．3 方法 A液和 B液在臨用前 10：1混臺(tái)．25ul樣 本中加入1．1ml混臺(tái)液，37"(315分鐘．在IsP—M半自 動(dòng) 生化分析儀上 測(cè)定 終點(diǎn)法，比空白調(diào)霉，波長(zhǎng) 600m'nt比色即可得出尿素的含量。同時(shí)以咎氨酰脫氫 醇偶聯(lián)反應(yīng)法，也在半自動(dòng)生化分析僅上進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分 析。
3 結(jié)果與討論
作者單位，五河縣壓院檢驗(yàn)科(233309) 試劑。但進(jìn)口試劑價(jià)格較貴，使用國(guó)產(chǎn)試劑或自配試劑 必須達(dá)到與進(jìn)口試劑相同的檢驗(yàn)效果，井用標(biāo)本質(zhì)控液 進(jìn)行標(biāo)定，方可使用 叢玉隆在血液分析儀應(yīng)用中的幾個(gè)問(wèn)題Ⅲ一文中 指出：細(xì)胞直方圖既給臨床提供診斷參考數(shù)據(jù)，也為操 作人員提供對(duì)儀器工作狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否可信的監(jiān) 控，一般必須在仔細(xì)分析直方圖后，確定是否需要顯微 鏡檢查再發(fā)報(bào)告。我們應(yīng)該不斷的總結(jié)經(jīng)驗(yàn) ，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題， 不斷提高專業(yè)人員的技術(shù)水平，使其更好的為臨床醫(yī)療 工作服務(wù)
3．1 線性范圍 在 0～71．4mraol／I范圍內(nèi)配制 Lo種 不同濃度的尿素溶液 ，每種濃度溶液重復(fù)測(cè)定 3捷 該 法在尿素維度o～28mraol／I之閫線性良好。
3．2 精密度實(shí)驗(yàn) 選用高、中、低值尿素(濃度為 Lo． 71、5．36、357mmol／I)，測(cè)定 2O次，其批內(nèi)CV分別為 31％、23 、2．1’6，其批同 CV分別為 4．2％、3．6 、 3．2％ 。
3．3 回收事實(shí)驗(yàn)
在尿素濃度為 7．87和 21．50mmol／ l的血清標(biāo)本中，加入尿素濃度為 6．Ommol／1．，然后進(jìn)行 測(cè)定，其回收率分別為 90 和 98
3．4 干擾實(shí)驗(yàn) 配制 513mmol／1膽紅索、7．6retool／ 1CHO、3．5mmol／1甘油三酯、4gA血紅蛋白做干擾實(shí) 驗(yàn)．發(fā)現(xiàn)無(wú)明顯干擾 (P>005)t維生索 C濃度低于
75mg／1時(shí)無(wú)干擾(P>0．05)實(shí)驗(yàn)室使用的重氨試劑對(duì) 苯磺酸可干擾反應(yīng)．測(cè)定時(shí)應(yīng)防止此類物質(zhì)在實(shí)驗(yàn)室中 污染 。
3．5 準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn) 用 OPA顯色法和各氧酰脫氫酶偶聯(lián)速率法同時(shí)測(cè)定血清標(biāo)本 50倒(本院門(mén)診健康體檢 者)，分別得 土S為 5．18士1．70、5．28±1．73。統(tǒng)計(jì)學(xué)
處理，兩法無(wú)顯著性差異(P>0．05)，相關(guān)系數(shù) r為 o． 9804．回歸方程 Y一1．0ix+0．0456。
總之，鄰苯二甲醛法測(cè)定尿索既有酶法的方便．可 自動(dòng)化分析，又價(jià)廉，試劑穩(wěn)定可室溫保存，且變異小干 擾固索少，線性范圍良好，并與酶法有高度相關(guān)。實(shí)踐證
明該法不失為經(jīng)濟(jì)、實(shí)用值得推廣的尿素測(cè)定技術(shù)。
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尿素是最早被測(cè)定的體液中的物質(zhì)之一t其測(cè)定方 法主要有二乙酰乙肟法、脲酶法、酶偶聯(lián)速率法等t這些方法或是存在煮沸，或是試劑價(jià)格較昂貴 目前，市場(chǎng)上
供應(yīng)了鄰苯二甲醛顯色法(OPA)測(cè)定尿素試劑盒，該 法不需煮沸，簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定易得。我們根據(jù)反應(yīng) 原理，在 ISP-M 半自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行尿素測(cè)定， 效果滿意。特做報(bào)道
1 原理
在酸性環(huán)境中，血清中的尿素在_妾替比林存在下與 鄰苯二甲醛作用生成黃色物質(zhì)，該物質(zhì)在偏釩酸根的作 用下變?yōu)樗{(lán)色物質(zhì)。該物質(zhì)藩液顏色的深淺在一定范圍
內(nèi)與血清尿素濃度成正比，與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)物一起比 色測(cè)定，即可得到血清標(biāo)本中尿素的濃度。
2 材料與方法
2．I 試劑 OPA法測(cè)定尿索試劑盒}其中包括A液 B 液，尿素標(biāo)準(zhǔn)液，僳定長(zhǎng)城臨床試劑公司t批號(hào) 951102。 酶偶聯(lián)速率法測(cè)定尿素試劑盒：上海長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限
公司，批號(hào) 950828
2．2 儀器
IsP—M 半自動(dòng)生化分析僅，型號(hào)V／talob 一 21。
2．3 方法 A液和 B液在臨用前 10：1混臺(tái)．25ul樣 本中加入1．1ml混臺(tái)液，37"(315分鐘．在IsP—M半自 動(dòng) 生化分析儀上 測(cè)定 終點(diǎn)法，比空白調(diào)霉，波長(zhǎng) 600m'nt比色即可得出尿素的含量。同時(shí)以咎氨酰脫氫 醇偶聯(lián)反應(yīng)法，也在半自動(dòng)生化分析僅上進(jìn)行動(dòng)力學(xué)分 析。
3 結(jié)果與討論
作者單位，五河縣壓院檢驗(yàn)科(233309) 試劑。但進(jìn)口試劑價(jià)格較貴，使用國(guó)產(chǎn)試劑或自配試劑 必須達(dá)到與進(jìn)口試劑相同的檢驗(yàn)效果，井用標(biāo)本質(zhì)控液 進(jìn)行標(biāo)定，方可使用 叢玉隆在血液分析儀應(yīng)用中的幾個(gè)問(wèn)題Ⅲ一文中 指出：細(xì)胞直方圖既給臨床提供診斷參考數(shù)據(jù)，也為操 作人員提供對(duì)儀器工作狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否可信的監(jiān) 控，一般必須在仔細(xì)分析直方圖后，確定是否需要顯微 鏡檢查再發(fā)報(bào)告。我們應(yīng)該不斷的總結(jié)經(jīng)驗(yàn) ，發(fā)現(xiàn)問(wèn)題， 不斷提高專業(yè)人員的技術(shù)水平，使其更好的為臨床醫(yī)療 工作服務(wù)
3．1 線性范圍 在 0～71．4mraol／I范圍內(nèi)配制 Lo種 不同濃度的尿素溶液 ，每種濃度溶液重復(fù)測(cè)定 3捷 該 法在尿素維度o～28mraol／I之閫線性良好。
3．2 精密度實(shí)驗(yàn) 選用高、中、低值尿素(濃度為 Lo． 71、5．36、357mmol／I)，測(cè)定 2O次，其批內(nèi)CV分別為 31％、23 、2．1’6，其批同 CV分別為 4．2％、3．6 、 3．2％ 。
3．3 回收事實(shí)驗(yàn)
在尿素濃度為 7．87和 21．50mmol／ l的血清標(biāo)本中，加入尿素濃度為 6．Ommol／1．，然后進(jìn)行 測(cè)定，其回收率分別為 90 和 98
3．4 干擾實(shí)驗(yàn) 配制 513mmol／1膽紅索、7．6retool／ 1CHO、3．5mmol／1甘油三酯、4gA血紅蛋白做干擾實(shí) 驗(yàn)．發(fā)現(xiàn)無(wú)明顯干擾 (P>005)t維生索 C濃度低于
75mg／1時(shí)無(wú)干擾(P>0．05)實(shí)驗(yàn)室使用的重氨試劑對(duì) 苯磺酸可干擾反應(yīng)．測(cè)定時(shí)應(yīng)防止此類物質(zhì)在實(shí)驗(yàn)室中 污染 。
3．5 準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn) 用 OPA顯色法和各氧酰脫氫酶偶聯(lián)速率法同時(shí)測(cè)定血清標(biāo)本 50倒(本院門(mén)診健康體檢 者)，分別得 土S為 5．18士1．70、5．28±1．73。統(tǒng)計(jì)學(xué)
處理，兩法無(wú)顯著性差異(P>0．05)，相關(guān)系數(shù) r為 o． 9804．回歸方程 Y一1．0ix+0．0456。
總之，鄰苯二甲醛法測(cè)定尿索既有酶法的方便．可 自動(dòng)化分析，又價(jià)廉，試劑穩(wěn)定可室溫保存，且變異小干 擾固索少，線性范圍良好，并與酶法有高度相關(guān)。實(shí)踐證
明該法不失為經(jīng)濟(jì)、實(shí)用值得推廣的尿素測(cè)定技術(shù)。
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